Jogo ácido nucleico principal amarelo da detecção do vírus (YHV) (método RT-PCR-fluorescente da ponta de prova)

 
Uso pretendido:

Este jogo é apropriado para a detecção específica do vírus principal amarelo patogênico (YHV) em amostras de tecido tais como brânquias, glândulas das antenas, tecidos hematopoietic e órgãos linfáticos do camarão de penaeus.

Princípio:
 
Este jogo usa o RNA como um molde e as primeiras demão como um ponto de partida para sintetizar as costas do cDNA complementares ao molde do RNA sob a ação do transcriptase reverso de grande eficacia. Escolha a ponta de prova específica do projeto conservador do gene do vírus do cálice do gato, a ponta de prova pode com área da amplificação da primeira demão no meio de um molde obrigatório específico do ADN, em processo da extensão do PCR, as enzimas limitadas da polimerase de Taq do 5" extremidade de grupos fluorescentes na ponta de prova será reduzido, feito livre no sistema de reação, extinguindo desse modo grupos fora do 3" extremidade, o fulgor, o ácido nucleico da cabeça que amarela do camarão o vírus (YHV) foi detectado pelo PCR da fluorescência em um sistema de reação completamente fechado.
 
Componentes principais:
 

1. Tipo da amostra

Amostras de tecido do camarão

2. Coleção da amostra

As amostras foram recolhidas de acordo com SNT 1151.4-2003.

Tome o tecido fresco do camarão como a amostra.

2,1 para larvas ou o camarão novo, o camarão ou as cabeças inteiras do camarão são tomados como amostras. Para remover a cabeça, usar tesouras da esterilização e pinça para remover os olhos, o breastplate, todos os anexos torácicos, e abdômen atrás da cabeça.

2,2 para o camarão adulto, os filamentos da brânquia, os órgãos linfáticos ou o hemolymph foram tomados como amostras.

3. Preservação da amostra

Pode ser armazenado por 24 horas em 2℃~8℃, e pode ser armazenado por muito tempo em -20℃.

Amplificação do PCR e detecção da fluorescência (área da detecção do PCR):

Põe cada tubo da reação no instrumento do PCR e execute a amplificação do PCR de acordo com os seguintes procedimentos:

FAM é selecionado para os canais da detecção.

Controle da qualidade:

1. Controle negativo: Nenhuma curva óbvia da amplificação do canal da detecção de FAM;
2. Controle positivo: O canal de FAM mostrou a curva óbvia da amplificação, valor ≤30 do Ct;
3. As circunstâncias acima são estadas conformes simultaneamente na mesma experiência; de outra maneira, a experiência é inválida e reexaminar é exigido.

Os resultados da interpretação

Nota: O resultado é julgado para ser a área cinzenta, que precisa de ser verificada novamente. Se verifique novamente o resultado é valor do Ct < 45="" is="" considered="" as="" positive="">

Índice do desempenho de produto:

1. Precisão

Os materiais de referência positivos de empresas de teste eram toda positivos.

2. Limite de detecção mínimo: o limite de detecção deste jogo é 10copies/μL.

3. Precisão: O coeficiente de variação (CV, %) do valor do Ct da precisão do intra-grupo é ≤5%.

4. Coeficiente de correlação linear, linear | r | > 0,980.

Os detalhes da operação satisfazem verificam de IFU!