Ensaio de SARS-COV-2 RT-qPCR (método triplo da fluorescência RT-PCR), detecção de genes de ORF1ab e de N do SARS CoV 2

O ensaio do qPCR de SARS-COV-2 RT é um teste reverso da reação em cadeia da polimerase do transcriptase do tempo real (rt) (RT) (PCR) pretendido para a detecção qualitativa de genes de ORF1ab e de N do SARS CoV 2 no cotonete (NP) nasopharyngeal, no cotonete (OP) orofaríngeo e no espécime do escarro recolhidos por um trabalhador dos cuidados médicos, dos pacientes suspeitados de COVID-19 por seu fornecedor de serviços de saúde.

Características

• Precisão alta
• Limite de detecção: 200 copies/mL
• Sensibilidade: 100%
• Especificidade: 99,1%
• Precisão: 99,3%

Operação conveniente

as Triplex-detecções em uma únicas primeira demão e ponta de prova do tubo (genes de ORF1ab & de N, gene humano do RNAse P (RNP)) premixed o formulário líquido

Seguro

• Sistema antipoluição: UDG
• Controle interno: Gene humano de RNaseP (RNP)
• Controle positivo: Pseudovirus

Rápido

Resultado em aproximadamente 1 hora

INSTRUMENTOS APLICÁVEIS:

Instrumento do PCR do tempo real com canais de FAM, de TEXAS RED/ROX e de HEX/VIC, tais como ABI7500, ABI Q3, ABI Q6, bio Rad CFX96.

Pneumonia nova do coronavirus (coronavirusdisease2019, covid-19). a infecção sars-cov-2 é um problema de saúde público global sério que cause perdas econômicas severas no mundo inteiro, conduzindo a Organização Mundial de Saúde (WHO) para caracterizar a manifestação sars-cov-2 como uma emergência da saúde pública do interesse internacional.

A seleção adiantada de casos suspeitados e de isolamento e o tratamento dos pacientes contaminados com sars-cov-2 são chaves a controlar a manifestação, porque não há nenhuma droga ou vacina específica disponível para tratar a pneumonia do neocrown. Atualmente, a bandeira de ouro para o diagnóstico da infecção sars-cov-2 é a reação em cadeia da reversetranscription-polimerase (rt-pcr). Desde a liberação do genoma completo de sars-cov-2, os laboratórios da saúde pública, os laboratórios clínicos e as empresas diagnósticas dos países diferentes desenvolveram uma variedade de métodos rt-pcr para a detecção sars-cov-2, visando genes diferentes e regiões genomic do genoma viral (orf1ab, rdrp, n, e, etc.).

Contudo, o método rt-pcr revelou muitos inconvenientes e defeitos na prática, especialmente durante emergências da saúde pública tais como a manifestação sars-cov-2 atual. os métodos rt-pcr são incômodos executar e precisar de ser executado em instrumentos do pcr por técnicos de laboratório profissionais treinados.

Isto faz difícil encontrar a procura para testes no local, e para áreas remotas ou hospitais preliminares com recursos limitados, as amostras devem ser transportadas a um hospital de mais alto nível com facilidades de testes rt-pcr para testar. Isto é não somente demorado mas igualmente aumenta o risco de exposição do vírus. Além, o rt-pcr para os testes sars-cov-2 durante a pandemia covid-19 produziu uma taxa alta do falso negativo (30-50%) para um número de razões, que permanecesse um problema não-insignificante.

A reação catalítica do auto-conjunto do ADN do gancho de cabelo (catalytichairpinassembly, cha) é um sistema ácido nucleico enzima-livre isothermal da amplificação do sinal. Dois grupos de ADN único-encalhado complementar sondam com uma estrutura do gancho de cabelo são projetados baseado no fragmento do RNA do alvo que está sendo detectado. Quando o fragmento do alvo não está atual, ambos os grupos de ADN único-encalhado estam presente em uma estrutura do gancho de cabelo.

Quando o fragmento do RNA do alvo esta presente no sistema, os dois grupos de pontas de prova único-encalhadas do ADN com estrutura do gancho de cabelo abrirão a estrutura do gancho de cabelo por sua vez e formarão uma costa dobro do ADN sob o efeito catalítico do RNA do alvo. O processo catalítico inteiro não consome o fragmento do RNA do alvo, e o fragmento do RNA do alvo incita os dois grupos de pontas de prova único-encalhadas do ADN para formar uma costa dobro antes de continuar à seguinte rodada da reação, assim criando a amplificação do sinal. Finalmente, a detecção do fragmento do RNA do alvo é conseguida detectando a ponta de prova dobro-encalhada do ADN.