Jogo ácido nucleico da detecção do vírus de Monkeypox (método do PCR da fluorescência)

[ESPECIFICAÇÃO]

24tests/kit, 48tests/kit, 96tests/kit

[USO PRETENDIDO]

Este jogo é usado para conseguir a detecção qualitativa de ADN viral de Monkeypox extraído das amostras do sangue inteiro, do soro ou do exsudado da lesão de pacientes contaminados suspeitados e outros de pacientes que exigem o diagnóstico.

[PRINCÍPIO]

Este jogo usa a tecnologia fluorescente do PCR do tempo real para selecionar uma região relativamente conservada de fragmento ácido nucleico do vírus de Monkeypox como a região do alvo da amplificação, as primeiras demão específicas do projeto e as etiquetas fluorescentes diferentes da ponta de prova, e usa a tecnologia de RT-PCR para detectar se a amostra contém o ADN viral de Monkeypox.

[COMPONENTE]

Nota:

Não misture os componentes dos grupos diferentes para a detecção.

Reagentes ácidos nucleicos da extração: Recomende o reagente ácido nucleico da extração fabricado por Dewei.

Nenhuma extração ácida nucleica da necessidade ao usar o controle positivo, extração do ácido nucleico é exigida ao usar o controle negativo.

[ARMAZENAMENTO E ESTABILIDADE]

O jogo pode ser armazenado no ℃ -20±5 por 12 meses.

Temporariamente loja no ℃ 4 para o dia 7.

A congelação repetida e thawing não devem exceder 7 vezes, abrindo o reagente não devem exceder 7 vezes.

O gelo seco para manter o transporte da baixa temperatura não deve exceder 4 dias.

[INSTRUMENTOS]

Instrumento do PCR do tempo real tal como ABI7500, ABI7300, LightCycler480, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S e QuantStudio.

[PROVANDO E SEGURANDO]

• Tipo apropriado do espécime: amostras do soro e do exsudado da lesão.
  2. coleção: O espécime deve ser recolhido nos tubos estéreis de acordo com o padrão
  especificações técnicas.
  Armazenamento: O espécime recolhido deve ser usado para a detecção imediatamente ou ser congelado em
  ≤-20°C para não mais de um mês. A congelação repetida e thawing devem ser evitar.
  3. transporte: O espécime deve ser transportado usando a caixa selada da espuma com gelo.

[PROTOCOLO]

• Tratamento da amostra e extração ácida nucleica (área do tratamento da amostra)

Recomenda-se tomar a 200μL amostras líquidas, o controle positivo e o controle negativo para a extração ácida nucleica, de acordo com as exigências e os procedimentos correspondentes de jogos virais da extração do ADN.

• Preparação do reagente do PCR (área da preparação do reagente)

Põe os tubos do PCR no tanque da reação e ajuste os nomes de cada reação bem na ordem correspondente.

Remova o reagente A e B do PCR do MVP do jogo, a aproximação amigável na temperatura ambiente, a agitação e a mistura, centrifugador em 8.000 RPM por alguns segundos antes de usar.

Tome PCes de N dos tubos da reação do PCR (N = número de amostras a ser testadas + controle negativo + o controle positivo)

A configuração sistema da amplificação do MVP do único é como segue:

Após ter misturado os componentes completamente, o centrifugador dispensa por um curto período de tempo de modo que todo o líquido na parede do tubo seja centrifugado à parte inferior do tubo, e então o µl 20 do sistema da amplificação nos tubos do PCR.

• Provar (área da preparação da amostra)

Adicione 5µl de cada um o controle negativo processado, o ácido nucleico da amostra a ser testada, e o controle positivo do MVP aos tubos acima do PCR, firmemente os tampões do tubo e o centrifugador em 8.000 RPM por alguns segundos, então transferência à área da detecção da amplificação.

• Amplificação do PCR (área da amplificação)

Põe os tubos do PCR no tanque da reação e ajuste os nomes de cada reação bem na ordem correspondente.

Ajustes da fluorescência da detecção: (1) vírus de Monkeypox (FAM); controle interno (de 2) (CY5).

Corra o seguinte protocolo de ciclagem: ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S e QuantStudio, consultam por favor para prover o manual do usuário para a melhor operação:

• Análise dos resultados (consulte por favor para prover o manual do usuário)

Após a reação, os resultados salvar automaticamente. Clique “para analisar” para analisar, e o instrumento interpretará automaticamente valores do Ct de cada amostra na coluna do resultado. Os resultados negativos e positivos do controle conformar-se-ão ao seguinte

De “controle 5. qualidades”.

• Controle da qualidade

Controle negativo: Nenhum Ct ou Ct>40 no canal de FAM, Ct≤40 no canal CY5 com a curva normal da amplificação.

Controle positivo: Ct≤35 no canal de FAM com a curva normal da amplificação, Ct≤40 no canal CY5 com a curva normal da amplificação.

O resultado é válido se todo o acima dos critérios é encontrado. Se não, o resultado é inválido.

[INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS]

Os seguintes resultados são possíveis:

NOTA: Se inválido o resultado para ocorrer, a amostra precisa de ser recolhido outra vez e testado.

[LIMITAÇÕES DA DETECÇÃO]

O resultado da detecção deste jogo é somente para a referência clínica, e não deve diretamente ser usado como a evidência para o diagnóstico e o tratamento clínicos. A gestão clínica dos pacientes deve ser considerada em combinação com seus sintomas, história médica e história da exposição.

O resultado da detecção pode ser afetado operações, incluir a coleção de espécime, por armazenamento e por transporte. O resultado do falso negativo pode ocorrer se há algum erro na operação. A contaminação transversal durante o tratamento do espécime pode conduzir ao resultado de falso positivo.

[ESPECIFICAÇÕES DE RENDIMENTO]

Limitação da detecção: 500 cópias /mL.

Precisão: O coeficiente de variação (CV, %) do valor do Ct do dentro-grupo/entre-batchprecision é ≤5%.

Precisão: A taxa da conformidade referência negativa/positiva: 100%.

Especificidade: nenhuma reatividade cruzada com genoma humano e os seguintes micróbios patogênicos: vírus de varíola, vírus de pox dos carneiros, vírus da varíola bovina, vírus de catapora, vírus da hepatite B, vírus da hepatite C, vírus de imunodeficiência humana, enterovírus.

[ATENÇÕES]

• Este produto é usado somente para in vitro o teste. Leia por favor este manual com cuidado antes de usar.
• Use os tubos estéreis, DNase-livres e RNase-livres e as pontas durante a detecção.
• Durante a detecção, é necessário evitar a contaminação colateral, vestir equipamentos protetores apropriados, luvas descartáveis e máscaras, e termina a operação no armário da seguridade biológica para evitar as substâncias prejudiciais que incorporam as vias respiratórias.
• Em caso do contato com pele e mucosa durante o uso, enxágüe por favor imediatamente com água de fluxo, que não causará nenhum dano ao operador.

Todos os reagentes líquidos devem inteiramente ser derretidos e misturado na temperatura ambiente antes de usar, e ser centrifugados em 8.000 RPM por alguns segundos antes de usar.

O depois de uso, o empacotamento e o líquido do desperdício devem uniformemente ser tratados como o desperdício médico para impedir a poluição.