Jogo do teste do anticorpo ELISA da gripe das aves da precisão alta (H5N1), 96wells/kit, uso profissional

1. Sumário

Este antígeno da fase contínua do uso AIV H5N1 do jogo para detectar o anticorpo específico contra o antígeno de AIV H5N1, tem a sensibilidade alta, especificidade, reprodutibilidade, e é fácil de operar rapidamente e pode ser usado dividually em épocas múltiplas.

2. Reagentes e índices

3. materiais exigidos mas não fornecidos

1 leitor de Microplate (que inclui o comprimento de onda 450nm/630 nanômetro).

caixa da temperatura 2 37℃ constante

3 Micropipettes, ajustáveis.

4. exigência da amostra

1. As amostras são soro, tempo de armazenamento devem realizar-se por 7 dias no ℃ 2-8, se para o prazo, deve ser mantido em -20℃ ou abaixo dele. Avoid repetiu a congelação e thawing.

2. Evite para usar as amostras que contêm o azotureto do sódio, elevação - colesterol, com bactérias e o hemolytic severo

5. procedimento de teste

1. Preparação de lavagem da solução

A solução de lavagem (solução No.2) Dilute com água destilada ou água deionized no 1:10, por exemplo adiciona a água destilada 900ml ou a água deionized na solução de lavagem de 100 ml, e mistura-os completamente.

2. Diluente da amostra:

Dilua a amostra do soro com o diluente da amostra (solução No.5) no 1:100, por exemplo o soro de 5 μl + diluente da amostra de 495 μl, mistura completamente.

3. Adicionando amostras e controles

Para cada teste, ajuste 2 poços para o controle negativo, 2 poços para o controle positivo. Adicione o controle negativo, controle positivo respectivamente, 100μl/well. Ajuste um controle vazio bem, não adicione nada. Para a amostra bem, adicione a amostra diluída do soro, 100μl/well. Incubação no ℃ 37 na obscuridade por 30 minutos. Rejeite o líquido dos poços e encha todos os poços com a solução de lavagem diluída, incube-os para 1 minuto e descarte. Repita o procedimento de lavagem 3 vezes tão acima. No fim da etapa de lavagem, remova com cuidado permanecer fluido batendo as tiras no lenço de papel antes do passo seguinte.

4. Adicionando o conjugado da enzima

Independentemente do controle vazio bem, adicione o conjugado da enzima 100ul (solução No.1) em todos os poços e incube-o no ℃ 37 na obscuridade por 30 minutos. Rejeite o líquido dos poços e lave 3 vezes como descrito em etapa 3.

5. Adicionando carcaças

A carcaça A da mistura (solução No.3) e a carcaça B (solução No.4) em volumes iguais, adicionam no cada bem, 100μl/well, incubam em uma obscuridade de 37 ℃ por 10 minutos.

6. Adicione uma gota de param a solução (solução No.6) da reação em todos os poços. Antes de ler resulta com o leitor da placa de microtiter de ELISA, ajustam o poço A1 da placa do reagente a zero. Meça o valor do OD de todos os poços em 450 nanômetro (comprimento de onda da referência: 630 nanômetro).

6. Referência

Juiz da validação

Valor do OD do poço negativo ≤0.15 do controle (inválido se > 0,15);

Valor do OD do poço positivo ≥0.30 do controle (inválido se < 0="">

7. Interpretação dos resultados

Valor do OD do valor do OD do ≥ da amostra do meio positivo X 1,1 do controle: Positivo do anticorpo H5N1;

Valor do OD do valor da amostra <OD do meio positivo X 0,9 do controle: Negativo do anticorpo H5N1;

Valor do OD do meio positivo X 0,9 do controle < OD="" value="" of="" sample="">

Valor do OD do valor da revisão ≤OD da amostra do meio positivo X 1,1 do controle: Negativo do anticorpo H5N1

8. Limitação

Este jogo é somente apropriado para o soro de teste da galinha.

9. Notas

1) Microwell deve ser selado e umidade-prova. A placa de MicroWell removida do ambiente refrigerado deve ser umidade equilibrada a secar na temperatura ambiente, a seguir pode ser aberta. Placa não utilizada para trás posta de MicroWell no saco seco da folha e selada no ℃ 4.

2) Antes de deixar cair o reagente, a garrafa deixando cair da agitação delicadamente a mesmo, rejeita a primeira gota; Mantenha a verticalidade da garrafa deixando cair ao adicionar reagentes.

3) Cubra a diferença firmemente após a utilização todas as vezes. Não misture usando o tampão. Não use reagentes do lote diferente.

4) Trate os jogos e os reagentes usados como o material da poluição. A solução da parada é corrosiva, seja cuidadosa usar-se.