O Bioneovan RUO HAV- IgG ELISA é um imunotestamento in vitro ligado a enzimas fornecido para a detecção de HAV- IgG no soro ou no plasma humano.Está destinado a ser utilizado como auxiliar no diagnóstico suplementar dos estudos de infecção aguda por hepatite A e de prevalência na população..

Este kit utiliza o método de captura ELISA para detectar IgG anti-HAV. O anticorpo purificado de IgG anti-humano do rato (μchain) é revestido na fase sólida de vários poços.Uma HAV-Ag conjugada é adicionada aos poços revestidos após adição de uma amostra diluída e incubação.Se a HAV-IgG estiver presente na amostra, formar-se-á um complexo de Anti-μ-cadeia-HAV-IgG -marcado com HRP.Lavar os poços para remover outros componentes do soro sem limite, incubar com substrato (TMB) para formar um produto colorido e medir a absorvência a 450 nm para indicar a presença ou ausência de HAV-IgG na amostra.Reproduzível e fácil de operar.

Principais componentes

1Placa de micro-cabeça revestida anti-μ-cadeia

2Conjugante enzimático (HAVAg-HRP)

3. Conjugar HAV-Ag

4. soro de controlo negativo

5- Serum de Controle Positivo.

6. 20 X Wash Buffer (dilução antes da utilização)

7Substrato A

8Substrato B

9Parem a Solução.

10Saco de plástico.

11Papel de selos

12Manual.

Procedimento de ensaio

1. Leve o kit ELISA para anticorpos IgM contra o vírus da hepatite A (todos os reagentes) e as amostras à temperatura ambiente antes de utilizar (aproximadamente 30 minutos).

2. diluir tampão de lavagem concentrado 1:19 com ddH₂O.

3Diluir a amostra (1:1000) com solução fisiológica salina.

4Para cada ensaio, colocar um controlo em branco, dois controlos positivos e três controlos negativos.

5Adicionar 100 μl de amostra diluída a outros poços de ensaio.

6Cobrir os poços com papel de vedação e incubar durante 30 minutos a 37°C.

7. Despeje o líquido em todos os poços e encha os poços com solução de lavagem.Repetir 5 vezes e secar bem após a última lavagem.

8Adicionar 50 μl de HAV-Ag conjugado em cada poço, com excepção do branco.

9Adicionar 50 μl de conjugante enzimático em cada poço, exceto no branco.

10Cobrir os poços com papel de vedação e incubá-los durante 30 minutos a 37°C.

11Repita o passo 7.

12Adicionar 50 μl de substrato A e B, respectivamente, a cada poço, misturar suavemente protegido da luz e incubar durante 15 minutos a 37°C.

13Adicionar 50 μl de solução de parada em cada poço para parar a reacção, incluindo o poço em branco.

14Medir a absorvência a 450 nm contra o branco ou medir a absorvência a 450 nm/630-690 nm.