25 humanos - vitamina Dihydroxy D; 25-dihydroxyvitamin D (3); 25-OH-DELISA Kit

Princípio

Este jogo de ELISA usa o sanduíche-ELISA como o método. O stripplate de Microelisa fornecido neste jogo foi pré-revestido com um anticorpo específico a 25 - a vitamina Dihydroxy D (25-OH-D). Os padrões ou as amostras são adicionados aos poços apropriados do stripplate de Microelisa e combinaram ao anticorpo específico. Então uma peroxidase do armorácio (HRP) - anticorpo conjugado específico para 25 - a vitamina Dihydroxy D (25-OH-D) é adicionada a cada stripplate de Microelisa bem e incubada. Os componentes livres são lavados afastado. A solução da carcaça de TMB é adicionada a cada poço. Somente aqueles poços que contêm 25 - a vitamina Dihydroxy D (25-OH-D) e HRP conjugaram 25 - anticorpo Dihydroxy da vitamina D (25-OH-D) parecerão azuis na cor e girarão então amarelo após a adição da solução da parada. A densidade ótica (OD) é medida spectrophotometrically em um comprimento de onda de 450 nanômetro. O valor do OD é proporcional à concentração de 25 - a vitamina Dihydroxy D (25-OH-D). Você pode calcular a concentração de 25 - a vitamina Dihydroxy D (25-OH-D) nas amostras comparando o OD das amostras à curva padrão.

Materiais fornecidos com o jogo

Notas: A curva padrão deve ser incluída em cada ensaio. Os poços Replicate são recomendados. Se o valor do OD da amostra é maior do que o primeiro poço dos padrões, dilua por favor a amostra (tempos de n) antes do teste. Ao calcular a concentração 25-OH-D original, multiplique por favor o fator total da diluição (XnX5).

Cálculo de resultados

Concentrações conhecidas do ser humano 25 - o padrão Dihydroxy da vitamina D (25-OH-D) e sua leitura correspondente OD são traçados na escala do log (x-linha central) e na escala do log (y-linha central) respectivamente. A concentração do ser humano 25 - a vitamina Dihydroxy D (25-OH-D) na amostra é determinada pelo traço o O.D. da amostra na Y-linha central. A concentração original é calculada multiplicando o fator da diluição.

Precisão

precisão do Intra-ensaio (precisão dentro de um ensaio): 3 amostras com os baixos, 25 humanos médios e de nível elevado - a vitamina Dihydroxy D (25-OH-D) foi testada 20 vezes em uma placa, respectivamente.

precisão do Inter-ensaio (precisão entre ensaios): 3 amostras com os baixos, 25 humanos médios e de nível elevado - a vitamina Dihydroxy D (25-OH-D) foi testada em 3 placas diferentes, 8 replicates em cada placa.

CV (%) = SD/meanX100

Intra-ensaio: CV<10>

Inter-ensaio: CV<12>

Escala do ensaio

3 ng/ml -80 ng/ml