Carneiros Insulina-como o fator-Eu do crescimento, Somatomedin, jogo de IGF-I ELISA

Princípio

Este jogo de ELISA usa o sanduíche-ELISA como o método. O stripplate de Microelisa fornecido neste jogo foi pré-revestido com um anticorpo específico a IGF-1. Os padrões ou as amostras são adicionados aos poços apropriados do stripplate de Microelisa e combinaram ao anticorpo específico. Então uma peroxidase do armorácio (HRP) - anticorpo conjugado específico para IGF-1 é adicionada a cada stripplate de Microelisa bem e incubada. Os componentes livres são lavados afastado. A solução da carcaça de TMB é adicionada a cada poço. Somente aqueles poços que contêm IGF-1 e o anticorpo IGF-1 conjugado HRP parecerão azuis na cor e girarão então amarelo após a adição da solução da parada. A densidade ótica (OD) é medida spectrophotometrically em um comprimento de onda de 450 nanômetro. O valor do OD é proporcional à concentração de IGF-1. Você pode calcular a concentração de IGF-1 nas amostras comparando o OD das amostras à curva padrão.

Materiais fornecidos com o jogo

Precisão

precisão do Intra-ensaio (precisão dentro de um ensaio): 3 amostras com o baixo, IGF-1 médio e de nível elevado foram testadas 20 vezes em uma placa, respectivamente.

precisão do Inter-ensaio (precisão entre ensaios): 3 amostras com o baixo, IGF-1 médio e de nível elevado foram testadas em 3 placas diferentes, 8 replicates em cada placa.

CV (%) = SD/meanX100

Intra-ensaio: CV<10>

Inter-ensaio: CV<12>

Escala do ensaio

0.3ng/ml -20 ng/ml

Sensibilidade:

0.05ng/ml

Notas:

• Armazene o jogo em 4°C em cima do recibo. O jogo deve ser equilibrado à temperatura ambiente antes do ensaio. Remova todas as tiras unneeded da placa IGF-1 Anticorpo-revestida bovina, reseal as na folha zip-lock e mantenha-as em 4°C.
• Precipitates pode aparecer no amortecedor de lavagem concentrado. Aqueça por favor o amortecedor para dissolver todo o precipita, que não afetará os resultados.
• A pipeta exata deve ser usada para evitar o erro experimental. As amostras devem ser adicionadas ao Microplate em menos de 5 minutos. Se um grande número amostras são incluídas, a pipeta do canal múltiplo está recomendada.
• A curva padrão deve ser incluída em cada ensaio. Os poços Replicate são recomendados. Se o valor do OD da amostra é maior do que o primeiro poço dos padrões, dilua por favor a amostra (tempos de n) antes do teste. Ao calcular a concentração do origina IGF-1, multiplique por favor o fator total da diluição (XnX5).
• A fim evitar a contaminação colateral, os aferidores de Microplate são para o único uso somente.
• Mantenha por favor a carcaça longe da luz.
• Toda a operação deve ser acordo com as instruções do fabricante restritamente. Os resultados determinados pelo leitor da placa de Microtiter.
• Todas as amostras, amortecedor de lavagem e desperdícios devem ser tratados como agentes infecciosos.
• Os reagentes dos lotes diferentes não devem ser misturados.