T4 DNA ligase
Não, não.
E1014-A/200 Weiss U; E1014-B/1,000 Weiss U; E1014-C/5,000 Weiss U
Concentração: 5 U/μl de Weiss
Descrição do produto
A DNA ligase T4 cataliza a formação de ligações fosfodiéster entre terminais 5'-fosfato e 3'-hidroxil justapostos em DNA ou RNA de cadeia dupla.Esta enzima é capaz de reparar cortes de cadeia única em DNA de cadeia dupla, RNA, ou híbridos DNA/RNA, e pode unir fragmentos de DNA com extremidades pegajosas ou contundentes, mas é inativo em ácidos nucleicos de cadeia única.
A DNA ligase T4 requer ATP como cofator.
Condição de armazenagem e prazo de validade
Armazenar a - 20°C. A validade do produto é de 2 anos.
Fonte
Estirpe recombinante de E. coli que contém o gene 30 clonado a partir de bactériofago T4.
Definição de unidade
A 37 °C, 1 unidade de enzima de Weiss cataliza a conversão de 1 nmol de [32PPi] num estado de adsorção de carbono ativado em 20 minutos.
A actividade enzimática é determinada na seguinte mistura: 66 mM Tris-HCl (pH 7,6), 6,6 mM MgCl2, 0,066 mM ATP, 10 mM DTT, 3,3 μM [32P] ortofosfato (PPi).
Uma unidade de Weiss equivale a aproximadamente 200 unidades de ligação de extremidades coesas (CEU), o que equivale ao número de fragmentos de ADN digeridos de HindIII que podem ser ligados em 30 minutos a 16°C.λ fragmentos de ADN.
Área de aplicação
- Fragmentos de ADN gerados por enzimas de restrição de clonagem
- Produtos PCR clonados
- Ligação de oligonucleotídeos de dupla cadeia ou adaptadores ao ADN
- Mutagénese localizada
- polimorfismo de comprimento de fragmento amplificado (AFLP)
- Detecção de ARN mediado por ligase
- Reparação de níquel em DNA, RNA ou híbridos de DNA/RNA de cadeia dupla
- Autocirculação do ADN linear