DNase I, RNase-Free, HC
Cat. n.o/Especificações: E1018-A/1000 U
Concentração: 50 U/μL
Descrição do produto
A DNase I (sem RNase) é uma endonuclease que pode clicar tanto o DNA de cadeia única quanto o de cadeia dupla.
ligações fosfodiéster, produzindo desoxirribonucleótidos únicos e oligodeoxirribonucleótidos com grupos 5'-fosfato e grupos 3'-OH.
A atividade desta enzima é estritamente dependente de Ca2+ e é ativada por íons Mg2+ ou Mn2+.DNase I corta cada cadeia de dsDNA de forma estatisticamente aleatória e independenteQuando o Mn2+ está presente, a enzima quase corta ambas as cadeias de ADN no mesmo local, resultando em fragmentos de ADN com extremidades contundentes ou sobressaltos de um ou alguns nucleotídeos.
Condição de armazenagem e prazo de validade
Armazenar a - 20°C.
Fonte
Estirpe recombinante de E. coli que contém o gene clonado que codifica a DNase I bovina.
Definição de unidade
Uma unidade é definida como a quantidade de enzima necessária para degradar completamente 1 μg de ADN plasmídico em 1 minuto a 37 °C.
A actividade enzimática é determinada na seguinte mistura: 10 mM Tris-HCl (pH 7,5 a 25°C), 2,5 mM MgCl2, 0,1 mM CaCl2 e 1 μg de ADN pUC19.
Uma unidade de DNase I é equivalente a 0, 3 unidades Kunitz.
Características
- Enzima recombinante
- Purificados a partir de um hospedeiro não animal, com baixos níveis de RNase endógena
Área de aplicação
- Para a preparação de RNA livre de ADN.
- Para remover o ADN modelo após a transcrição in vitro.
- Para preparar RNA livre de ADN antes da RT-PCR e RT-qPCR.
- Em conjunto com a DNA polimerase I para a rotulagem do ADN através da tradução de nick.
- Para o estudo das interações ADN- proteína utilizando a impressão de DNase I (livre de RNase).
- Para gerar uma biblioteca de fragmentos de inserção de ADN cortados aleatoriamente.